齲齒是世界上最常見的慢性口腔疾病之一。口腔細菌可附著于牙齒表面形成牙菌斑生物膜,同時其產(chǎn)生的酸性物質(zhì)能夠腐蝕牙齒礦物質(zhì),最終形成齲齒。由此引發(fā)牙疼影響進食,出現(xiàn)機體營養(yǎng)不良的現(xiàn)象,因此尋找一種對齲齒起預防及治療作用且安全持續(xù)有效的新型抗菌劑,是保護口腔健康的關(guān)鍵之一。
抗菌肽(antimicrobial peptides, AMPs),因具有天然來源、快速殺菌、不易產(chǎn)生耐藥性等特點受到了廣泛關(guān)注。大部分抗菌肽是陽離子抗菌肽,具有兩親性,一般由12~50個氨基酸短鏈構(gòu)成??咕目梢云茐募毎?、穿過細胞與核酸結(jié)合、抑制蛋白質(zhì)合成并阻止細胞壁的合成發(fā)揮殺菌作用。已有研究表明抗菌肽可以靶向殺死病原細菌,保護口腔健康微生物群落。
目前,國內(nèi)主要通過提取純化獲取駝乳源生物活性肽并分析其營養(yǎng)特性和功能特性,在人工合成駝乳生物活性肽方面尚處于空白階段。此外,天然駝乳源乳鐵蛋白活性肽來源困難,成本昂貴,而LFcin和LFampin抗菌效果更強。因此,本研究通過化學合成駝乳源LFA-LFC嵌合肽,并探究其對3種主要致齲菌[變異鏈球菌(Streptococcus mutans)、唾液鏈球菌(Streptococcus salivarius)、遠緣鏈球菌(Streptococcus sobrinus)]的抗菌能力及其作用機制。
本研究通過增加陽離子數(shù),嵌入1個賴氨酸連接LFampin265-284和駝乳LFcin17-30獲得駝乳源LFA-LFC嵌合肽,對S.mutans、S.salivariu和S.sobrinus具有快速高效的抑制殺滅作用;可以穿過細胞膜進入細胞內(nèi)部,與菌體DNA相互作用,破壞細胞的遺傳物質(zhì),阻礙細菌生長繁殖。這為優(yōu)化抗菌肽結(jié)構(gòu),深入探究抗菌肽的作用機制,維護人體口腔環(huán)境健康提供新思路。
表1.駝乳源LFA-LFC嵌合肽MIC、MBC的測定
表2.不同pH值駝乳源LFA-LFC嵌合肽MIC的測定
圖1.時間-致死曲線
圖2.預防變異鏈球菌、唾液鏈球菌、遠緣鏈球菌生物膜的形成
圖3.消除生物膜試驗
圖4.菌體TEM圖像
圖5.菌體CLSM圖像
圖6.菌體DNA電泳遷移率
圖7.駝乳源LFA-LFC嵌合肽溶血率
論文名稱:駝乳源乳鐵蛋白嵌合膚對口腔致齲菌抗菌作用的初步探究
期刊:食品與發(fā)酵工業(yè)
發(fā)表時間:2022.5
通信作者:吉日木圖
通訊作者單位:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學食品科學與工程學院
DOI號:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.031044